Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:58 min • July 8th, 2025
Commencez par une culture adhérente de cellules stromales de la moelle osseuse.
Soumettez les cellules à l’hypoxie, une condition caractérisée par des niveaux d’oxygène réduits, pendant une durée requise.
Isolez les cellules préconditionnées à l’hypoxie, puis centrifugez et retirez le surnageant. Remettre les cellules en suspension dans des milieux progéniteurs neuronaux contenant des facteurs de croissance neuronale.
Transférez les cellules dans une plaque de culture à faible adhérence et incuberez.
Le préconditionnement de l’hypoxie et les facteurs de croissance neuronale induisent la différenciation des cellules stromales en progéniteurs neuronaux.
La surface de la plaque à faible fixation maintient les progéniteurs en suspension, facilitant leur prolifération et leur agrégation en neurosphères tridimensionnelles.
Récoltez les neurosphères, centrifugez et éliminez le surnageant. Remettre les cellules en suspension dans des milieux d’induction gliale contenant des facteurs de croissance spécifiques de la glie.
Transférez les neurosphères dans une plaque de culture recouverte de laminine, un composant de la matrice extracellulaire, et de poly-D-lysine, un polymère synthétique char
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