Isolement de neurones DRG et coculture avec des précurseurs de cellules de Schwann pour générer des cellules de Schwann

Prenez la moelle épinière d’un embryon de rat avec des ganglions de la racine dorsale attachés, ou DRG, contenant des neurones et des cellules gliales.

Détachez les DRG individuels du cordon, transférez-les dans un tube et centrifugez-les, en éliminant tous les débris de tissus.

Ajoutez des enzymes pour dissocier les neurones DRG et les cellules gliales.

Faites tourner les cellules et retirez tous les débris. Ajouter un milieu d’entretien neuronal et du triturrate pour générer une suspension unicellulaire.

Transférez la suspension dans une microplaque recouverte d’un substrat de culture, favorisant l’adhésion cellulaire.

Introduisez un milieu de purification et incuberez. Les agents inhibiteurs du milieu éliminent les cellules gliales en division tandis que les neurones non diviseurs survivent.

Prenez des cellules de type cellules de Schwann, ou SCLC, dans un milieu de co-culture. Les SCLC, précurseurs des cellules de Schwann, interagissent avec les neurones nerveux périphériques embryonnaires.

Introduisez la suspension dans les neurones DRG et incuber. L’interaction des SCLC avec les neurones DRG favorise leur maturation en cellules de Schwann.

Les cellules de Schwann générées son