Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:35 min • July 8th, 2025
Prenez le petit ARN interférent, ou siRNA, un type d’ARN impliqué dans le silençage génique.
Ajoutez des vésicules lipidiques sphériques appelées liposomes.
Le liposome encapsule l’ARNi, le protégeant de la dégradation.
Ajoutez des complexes siARN-liposomes à une culture contenant des cellules souches neurales. Gardez-en un bien comme contrôle, et incubez.
Le liposome fusionne avec la membrane cellulaire, libérant l’ARNi.
Le siRNA se lie au complexe de silençage induit par l’ARN, ou RISC, où un brin est retiré.
Le brin restant cible l’ARNm responsable de la différenciation cellulaire, conduisant à sa dégradation.
Ajouter un milieu de différenciation approprié aux puits.
Dans le puits de contrôle, les facteurs de croissance et les autres nutriments du milieu favorisent la différenciation des cellules souches neurales en ostéoblastes.
À l’aide de techniques de coloration appropriées, colorez les cellules à l’aide de marqueurs spécifiques aux ostéoblastes et colorez le noyau avec un colorant fluorescent bleu.
L’absence de marqueurs spécifiques aux ostéoblastes dans les cellules réduites au silence indique leur incapacité à se différencier.
Pour effectuer l’inactivation des siRNA dans
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