Différenciation des cellules progénitrices neurales induites en astrocytes

Prenez une culture de cellules progénitrices neurales induites, ou iNPC, sur une plaque multipuits recouverte de protéines de matrice extracellulaire.

Remplacez le média par un média à induction gliale et incubez. Les facteurs de croissance et les hormones dans le milieu facilitent la différenciation des iNPC en cellules précurseurs gliales.

Changez de média tous les deux jours pour la prolifération cellulaire. Ensuite, remplacez le milieu par un milieu astrocytaire et incuberez.

Des nutriments spécifiques et des facteurs de croissance dans le milieu entraînent la différenciation des cellules précurseurs gliales en astrocytes.

Les changements de milieux tous les deux jours favorisent la maturation des astrocytes.

Changez le milieu en neuro-diff-medium lorsque les cellules sont confluentes à environ 70 % et continuez à changer de milieu tous les deux jours pendant trois semaines. Ne divisez pas les cellules lors de la différenciation. Après trois semaines, les cellules devraient exprimer le marqueur neuronal TuJ1.

Pour obtenir des neurones plus matures et des sous-types neuronaux, continuez la différenciation jusqu’à trois mois. Pour la différenciation des iNPC spécifiquement vers u