Différenciation d’une lignée cellulaire de neuroblastome humain en neurones matures
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:08 min • July 8th, 2025
Commencer avec une lignée cellulaire de neuroblastome indifférenciée comprenant des cellules neuronales et épithéliales dans un milieu à forte concentration sérique.
Retirer le milieu et ajouter un milieu de différenciation contenant une concentration sérique réduite, complété par de l’acide rétinoïque.
La privation sérique empêche la prolifération des cellules de type épithélial.
L’acide rétinoïque induit l’expression des gènes neuronaux dans les cellules neuronales, les transformant en un phénotype plus différencié.
Ajouter un cocktail trypsine-EDTA pour détacher les cellules partiellement différenciées.
Ajoutez un milieu contenant des protéines sériques pour bloquer la trypsine.
Plaquez les cellules et introduisez un nouveau milieu de différenciation contenant de l’acide rétinoïque et un taux sérique encore réduit.
Les cellules continuent de développer des processus étendus.
Ajoutez de la trypsine pour détacher les cellules.
Ensuite, ajoutez un milieu pour bloquer la trypsine et placez les cellules sur une boîte enrobée de protéines de matrice extracellulaire pour favoriser l’adhésion cellulaire.
Enfin, complétez avec un milieu sans sérum contenant des facteurs de croissance neu
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