Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:01 min • July 8th, 2025
Prenez des ganglions sensoriels prélavés dans un tube.
Ajoutez une solution de dissociation contenant un mélange d’enzymes digestives et incubez.
Ces enzymes décomposent la matrice extracellulaire, libérant des cellules individuelles.
Après l’incubation, retirez la solution de dissociation.
Lavez les ganglions avec un tampon phosphate et ajoutez une solution fraîche de dissociation.
Pipetez les ganglions de haut en bas pour dissocier les cellules.
Passez la suspension dans une passoire cellulaire pour éliminer les grumeaux.
Récupérez toutes les cellules restantes au fond de la passoire et mettez-les dans le tube.
Superposez la suspension cellulaire sur un tube à gradient de densité et centrifugez.
En fonction des différences de forme et de masse, les cellules migrent vers la couche inférieure, tandis que les débris cellulaires restent dans la couche supérieure.
Jetez la couche supérieure.
Ajouter le milieu frais à la suspension cellulaire restante et centrifuger.
Jetez le surnageant et stockez les cellules des ganglions sensoriels pour une utilisation ultérieure.
Après avoir récolté les ganglions sensoriels, aspirez 500 microlitres de solution de dissociation des ganglions de chaqu
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