Développement d’un modèle de culture cellulaire triple de la barrière hémato-encéphalique humaine

Commencez par ajouter des péricytes sur la face inférieure du puits d’insertion.

Couvrez l’insert avec une plaque de culture et incubez.

Les péricytes se fixent à la membrane du puits d’insertion, formant une couche unicellulaire ou une monocouche.

Prenez une autre assiette de culture.

Ajoutez des astrocytes humains dans le puits dans un milieu approprié. Ensuite, incubez l’assiette.

Les astrocytes se fixent au fond du puits et forment une monocouche.

Jetez le milieu et ajoutez du milieu frais d’astrocytes et de péricytes.

Maintenant, prenez la plaque de culture contenant le puits avec la couche de péricyte.

Retournez la plaque et transférez l’insert du puits dans le puits contenant la couche d’astrocytes.

Ajoutez les cellules endothéliales du cerveau humain sur la face supérieure du puits et incubez.

Les cellules endothéliales se fixent à l’insert du puits, formant un système de culture cellulaire triple qui ressemble à la barrière hémato-encéphalique, une interface cruciale séparant la circulation sanguine et le cerveau.

Commencez par cultiver l’HBVP dans des flacons de culture T75 avec une surface activée pour l’adhésion cellulaire à l’intérieur d’un incubateur de dioxyde de car