Génération d’une culture organoïde à partir d’une suspension de cellules tumorales cérébrales

Commencez avec un tube de microcentrifugation contenant une matrice extracellulaire riche en laminine ou lrECM. La laminine est un composant structurel présent en abondance dans le cerveau.

Gardez le tube sur de la glace pour éviter la polymérisation de l’IrECM.

Ajoutez des cellules tumorales cérébrales et mélangez soigneusement pour assurer une distribution uniforme des cellules.

Ensuite, transférez le mélange sur des moules en parafilm en formant des gouttelettes.

Incuber pour faciliter la polymérisation de la lrECM afin de former un échafaudage, imitant l’environnement naturel des cellules.

Maintenant, rincez les organoïdes solidifiés dans une boîte de Pétri contenant un milieu de culture, puis incuber.

Le milieu de culture fournit des nutriments essentiels et des facteurs de croissance, favorisant la division cellulaire.

Au sein de l’organoïde, les cellules s’auto-organisent en migrant et en envahissant.

Après l’incubation, inclinez la plaque pour déposer les organoïdes.

Retirez délicatement l’excédent de milieu et ajoutez-y du milieu frais.

Incuber en secouant doucement.

Cela répartit uniformément les nutriments et améliore la croissance des organoïdes.

Pour fabriquer des orga