Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:08 min • July 8th, 2025
Commençons par des colonies de cellules souches pluripotentes induites par l’homme cultivées sur une matrice de membrane basale adhérente.
Ajoutez un milieu de différenciation cérébelleuse contenant une hormone spécifique, un facteur de croissance et des inhibiteurs de petites molécules.
Soulevez les colonies à l’aide d’une pipette en verre et transférez-les sur une plaque de fixation ultra-basse.
La surface à faible fixation maintient les cellules en suspension, facilitant leur agrégation en corps embryoïdes tridimensionnels, ou EB.
L’hormone, le facteur de croissance et les inhibiteurs se lient à leurs sites cibles respectifs, favorisant la différenciation des cellules souches en progéniteurs neuronaux.
Transférez les EB dans des puits de plaque de culture recouverts d’un polymère synthétique et d’une protéine d’adhésion pour faciliter la fixation des EB.
Remplacez le milieu par un milieu de différenciation sans inhibiteur.
Les cellules commencent à migrer vers l’extérieur des EB, formant une monocouche 2D.
Retirez le milieu et ajoutez un milieu de maturation cérébelleux.
Les facteurs de croissance dans le milieu induisent la maturation des progéniteurs neuronaux en précurseurs n
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques