Génération de neurones et de cellules gliales à partir de corps embryoïdes dérivés de cellules souches pluripotentes induites par l’homme
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:00 min • July 8th, 2025
Prenez les corps embryoïdes, ou EB, dérivés de cellules souches pluripotentes induites par l’homme. Ces EB sont composés de trois couches germinales.
Transférez les EB dans une boîte de culture enrobée de matrice contenant un milieu approprié et incuberez.
La matrice permet aux EB de se fixer à la boîte de culture.
Les facteurs de croissance et les nutriments contenus dans le milieu aident les cellules ectodermiques des EB à former des agrégats neuroépithéliales disposés selon un motif circulaire appelé rosette.
Coupez les fragments de rosace et détachez-les du plat.
Collectez les fragments et faites-les tourner.
Jetez le surnageant et remettez les fragments en suspension.
À l’aide d’une pipette, déplacez les fragments de haut en bas pour les dissocier.
Ajoutez le nombre souhaité de cellules à une plaque à puits revêtue d’une matrice contenant un milieu de différenciation.
Les composants du milieu de différenciation aident les cellules neuroépithéliales à se transformer en cellules neuronales et gliales pleinement fonctionnelles, les cellules primaires du système nerveux.
Le deuxième jour, aspirez la solution de revêtement matriciel standard d’une boîte de 60 millilitres préalablem
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