Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:22 min • July 8th, 2025
Traitez le tissu embryonnaire du mésencéphale, riche en neurones dopaminergiques en développement, avec une solution de trypsine-EDTA pour les détacher de la matrice tissulaire.
Ajoutez un milieu de désactivation pour inhiber l’activité enzymatique, puis lavez pour éliminer les enzymes résiduelles.
Pipeter le tissu à plusieurs reprises. Les neurones embryonnaires possèdent moins de projections, ce qui réduit le stress lors de cette perturbation et génère une suspension unicellulaire.
Centrifugez et retirez le surnageant, puis remettez les neurones en suspension dans un milieu complet. Transférez ces neurones sur une lamelle recouverte de polymère pour la fixation des cellules.
Placez la lamelle dans une plaque multi-puits avec un milieu complet, fournissant des nutriments et des facteurs de croissance essentiels à la croissance des neurones.
Les antibiotiques contenus dans le milieu empêchent la croissance bactérienne, favorisant ainsi la viabilité neuronale.
Au fur et à mesure que les neurones grandissent et mûrissent, ils développent des projections cellulaires, telles que des axones et des dendrites, formant des connexions synaptiques.
De temps en temps, retirez la moitié du méd
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