Différenciation de cellules souches neurales en neurones à l’aide d’un dispositif microfluidique compartimenté

Prenons l’exemple d’un dispositif microfluidique composé de puits réservoirs reliés à deux compartiments, l’un somatique et l’autre axonal, séparés par une barrière à microsillons.

Les compartiments et les microsillons sont recouverts d’un substrat de culture cellulaire pour faciliter l’adhésion cellulaire.

Ajoutez un milieu de cellules souches neurales dans chaque puits et incubez pour préconditionner le dispositif à la culture cellulaire.

Jetez le support. Ajoutez des cellules souches neurales, ou NSC, dans les puits du compartiment somatique et permettez aux cellules d’adhérer.

Ajouter le milieu NSC dans chaque puits et incuber dans une chambre humidifiée pour éviter l’évaporation du média. Pendant l’incubation, les NSC prolifèrent.

Remplacez le milieu NSC par un milieu de différenciation neuronale et incuber.

Les petites molécules du milieu induisent la différenciation des NSC en neurones à l’intérieur du compartiment somatique, leurs axones s’étendant à travers les microsillons dans le compartiment axonal.

Les neurones différenciés avec des axones étendus sont prêts pour d’autres dosages.

Pour commencer, dissolvez la poly-l-ornithine dans de l’eau distillée de qualité culture