Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:24 min • July 8th, 2025
Prenez la rétine d’un rat, une couche sensible à la lumière de l’œil contenant des neurones ganglionnaires rétiniens, ou RGN.
Placez la rétine dans une solution saline équilibrée à froid pour éviter d’endommager les tissus.
Transférez la rétine dans une solution contenant de la protéase et de la DNase et coupez-la en petits morceaux.
Transférez le contenu dans un tube et incuber.
La protéase décompose la matrice extracellulaire et desserre les cellules, tandis que la DNase dégrade tout ADN contaminant.
Pipette de haut en bas pour disperser les amas de cellules.
Ajouter une solution inhibitrice pour arrêter l’action de la protéase.
Centrifugez les cellules pour les décanter. Retirez le surnageant et remettez les cellules en suspension dans un milieu de croissance approprié.
Ajoutez cette suspension cellulaire à la monocouche de cellules gliales engainantes olfactives ou OEG, un type de cellule gliale, et incubez.
Les RGN s’intègrent dans la monocouche OEG, établissant le modèle de coculture pour évaluer le potentiel neurorégénératif des OEG.
Placez la rétine dans une boîte de culture cellulaire P-60 préalablement préparée avec 5 millilitres d’EBSS froid. Ensuite, transférez-le dans
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