Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:49 min • July 8th, 2025
Commencez par un muscle de tête de rat et coupez-le en fragments.
Ajoutez un cocktail d’enzymes protéolytiques et incubez en secouant doucement.
Les enzymes digèrent la matrice extracellulaire du tissu, relâchant les fibres musculaires.
Ajoutez des milieux contenant des protéines sériques pour inactiver les enzymes.
Transférez le tissu dans un tube, centrifugez-le et jetez le surnageant.
Remettez le tissu en suspension dans le milieu. Répétez la perturbation mécanique et la centrifugation deux fois pour obtenir une suspension homogène de cellules satellites, des cellules souches cruciales pour la réparation et la régénération musculaires.
Récupérez le surnageant contenant des cellules satellites.
Passer à travers une crépine cellulaire pour obtenir une suspension unicellulaire. Centrifugez, jetez le surnageant et remettez les cellules en suspension dans le milieu.
Placez des gouttes de la suspension cellulaire sur des puits de lames de chambre recouverts de protéines de matrice extracellulaire.
La surface revêtue facilite la fixation des cellules satellites. Ajouter du média dans les puits.
Les facteurs de croissance dans les milieux induisent la prolifération des cellules satellit
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