Procédé de génération d’un milieu conditionné par des oligodendrocytes
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:01 min • July 8th, 2025
Prenez une boîte de Pétri recouverte de polymère.
Ajoutez la lignée des oligodendrocytes ou cellules OL à un milieu de culture approprié et incuberez.
La charge positive sur le revêtement polymère attire la membrane cellulaire chargée négativement, améliorant ainsi l’attachement des cellules à la boîte. Les facteurs de croissance et les nutriments contenus dans le milieu facilitent l’expansion cellulaire.
Remplacez le milieu par un milieu pauvre en nutriments et incubez.
De faibles niveaux de nutriments induisent un léger stress dans les cellules, les amenant à sécréter des protéines, des lipides et d’autres molécules, y compris des facteurs de croissance et des cytokines, dans l’espace extracellulaire.
Recueillir le milieu dans un tube.
Filtre : stérilisez le milieu pour éliminer les débris cellulaires et les composants insolubles.
Le filtrat contenant les molécules bioactives solubles sécrétées par les cellules OL est appelé milieu conditionné aux oligodendrocytes ou OCM.
Stockez l’OCM à des températures plus basses jusqu’à ce qu’il soit utilisé pour éviter la dégradation des protéines et d’autres molécules, préservant ainsi l’efficacité de l’OCM.
Plaquez deux ou trois boîtes de
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