Isolement des neurones ganglionnaires vestibulaires de l’oreille interne d’une souris

Prenez la moitié de la tête d’un bébé souris et retirez le cerveau.

Coupez le haut du crâne et excisez le tissu environnant pour visualiser la capsule otique, une couche externe osseuse protégeant les structures de l’oreille interne.

Transférez le tissu dans une plaque de culture contenant un milieu tamponné.

Séparez les ganglions vestibulaires supérieurs et inférieurs, qui contiennent les corps cellulaires du nerf vestibulaire.

Rasez la crête osseuse et récoltez le ganglion supérieur sous-jacent.

Transférez le ganglion supérieur dans une assiette fraîche contenant le milieu tamponné.

Retirez les tissus adhérents de la surface pour nettoyer le ganglion isolé.

Placez le ganglion dans une solution contenant des enzymes protéolytiques.

Les enzymes dégradent la matrice extracellulaire du tissu, relâchant les cellules.

Transférez le ganglion dans une boîte à fond de verre recouverte de polymère contenant un milieu de culture et dissociez mécaniquement le tissu pour libérer les cellules.

Incuber, permettant aux cellules d’adhérer et d’établir une culture de neurones ganglionnaires vestibulaires.

Retirez le cerveau de la souris euthanasiée à l’aide de ciseaux chirurgicaux fermés. Sectionn