Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:25 min • July 8th, 2025
Prenez des colonies de cellules souches embryonnaires humaines, ou CSEh, cultivées sur une matrice de soutien.
Aspirez le milieu et ajoutez des enzymes qui dégradent la matrice.
Lavez pour éliminer les enzymes. Ensuite, ajoutez un milieu et une pipette pour déloger les colonies détachées, en les brisant en petites grappes.
Transférez les grappes dans un milieu frais et incubez, ce qui permet aux grappes de former des agrégats sphériques.
Laissez les sphères se déposer et éliminez toutes les cellules mortes.
Incuber avec un milieu contenant le facteur de croissance basique des fibroblastes, ou bFGF, pour la prolifération cellulaire.
Se réapprovisionner avec des milieux contenant des concentrations de bFGF progressivement décroissantes pour faciliter la différenciation cellulaire.
Introduire un milieu d’induction neuronale, favorisant la différenciation des CSEh en cellules souches neurales ou NSC, transformant les sphères en organoïdes présentant une structure en forme de rosette neurale.
Ajoutez des antibiotiques pour empêcher la croissance de microbes contaminants lors d’une culture prolongée.
Les NSC se différencient en neurones et en glies, développant progressivement les organo
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