Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:52 min • July 8th, 2025
Prenez un segment de l’intestin grêle de souris préalablement dépouillé du muscle longitudinal et du plexus myentérique, des couches contenant des neurones entériques et des cellules gliales.
Découpez le tissu et placez-le dans un tampon contenant de l’EDTA. Incuber avec balancement.
L’EDTA perturbe les jonctions cellule-cellule, détachant la muqueuse épithéliale de la lamina propria et de la sous-muqueuse sous-jacentes, des couches de tissu conjonctif contenant des cellules gliales entériques.
Pipeter à plusieurs reprises pour déloger les cellules épithéliales.
Filtrez à travers une crépine de cellule et jetez le flux.
Transférez le tissu dans un tampon de dissociation non enzymatique et incubez-le à bascule. Le tampon de dissociation relâche la lamina propria et la matrice extracellulaire sous-muqueuse, détachant les cellules.
Pipeter à plusieurs reprises pour dissocier davantage les cellules.
Filtrez à travers une crépine pour collecter les cellules.
Centrifugez et remettez les cellules en suspension dans un tampon.
Prenez des puits enrobés de protéines d’adhésion contenant un milieu de croissance gliale et mettez les cellules en plaques.
Le revêtement facilite l’adhésion cellul
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