Purifier les capillaires d’un cerveau porcin
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:45 min • July 8th, 2025
Prenez un cerveau de porc.
Retirez les méninges, la membrane protectrice qui recouvre le cerveau, pour prévenir la contamination des cellules méningées.
Grattez la matière grise, une région riche en capillaires, et collectez le tissu dans une boîte de culture contenant du milieu.
Passez la matière grise dans une seringue sans aiguille pour fragmenter le tissu.
Transférez les fragments dans un homogénéisateur et homogénéisez-les pour désintégrer davantage le tissu, libérant ainsi les capillaires cérébraux.
Faites passer l’homogénat à travers un filtre avec une taille de pores spécifique pour retenir les capillaires, permettant ainsi à d’autres cellules cérébrales de s’écouler.
Placez le filtre dans une solution contenant des enzymes et de la DNase.
Les enzymes détachent les cellules adhérentes, tandis que la DNase dégrade l’ADN contaminant, facilitant ainsi l’isolement des capillaires purs.
Lavez les capillaires du filtre.
Ajoutez des milieux contenant des protéines sériques pour inactiver les enzymes.
Transférez les capillaires dans un tube, centrifugez et retirez le surnageant. Remettez en suspension les capillaires purs dans un milieu frais pour une analyse plus approfondie.
Pour
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