Isolement et culture de péricytes cérébraux de souris
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:43 min • July 8th, 2025
Ajoutez un tampon au tissu cérébral de la souris et homogénéisez-le pour libérer des cellules et des microvaisseaux.
Ensuite, ajoutez la solution BSA-dextran à l’homogénat. Mélanger et centrifuger pour séparer les composants. Jetez le surnageant.
Remettez les microvaisseaux en suspension dans le tampon et passez-les à travers un filtre, en retirant les plus gros vaisseaux.
Maintenant, centrifugez le filtrat et retirez le surnageant. Remettez les microvaisseaux en suspension dans un tampon contenant des ADN.
Ajoutez des enzymes protéolytiques pour libérer les cellules endothéliales et les péricytes.
Les DNases dégradent l’ADN.
Ajoutez un tampon contenant de la BSA pour arrêter l’activité enzymatique. Centrifugez et jetez le surnageant.
Remettez les cellules en suspension dans le milieu et plaquez-les sur une plaque multi-puits recouverte d’une matrice de base. Incuber, favorisant l’adhésion cellulaire.
Changez régulièrement de support.
Les cellules endothéliales forment une monocouche et soutiennent la croissance des péricytes.
Le passage cellulaire ultérieur dans un milieu péricytaire sur une plaque multipuits recouverte de gélatine favorise la croissance des péricytes tout en élim
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