Isolement des cellules de Schwann à partir de racines vertébrales de souris
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:45 min • July 8th, 2025
Prenez une racine nerveuse et coupez-la en petits morceaux.
Transférez dans un tube contenant des enzymes digestives et incuberez.
L’enzyme digère la matrice extracellulaire.
Ajoutez un milieu contenant du sérum pour arrêter la digestion.
Pipetez le contenu à plusieurs reprises, puis centrifugez et jetez le surnageant.
Remettez le granulé en suspension.
Passez la suspension dans une passoire pour éliminer les tissus non digérés. Incuber les cellules collectées dans une plaque.
Les fibroblastes et les cellules de Schwann ou SC se fixent à la plaque et se divisent.
Retirez les cellules non attachées. Lavez les cellules attachées avec un tampon de phosphate.
Ajoutez des enzymes digestives pour desserrer les CS sensibles à la digestion. Arrêtez la digestion avec des fluides.
Détachez complètement les SC en ajoutant du support.
Transférez les cellules dans un tube et centrifugez. Jetez le surnageant et remettez les cellules en suspension dans un milieu spécifique à la SC.
Transférez les cellules sur une plaque non revêtue et incuberez.
Tous les fibroblastes restants adhéreront, laissant les SC en suspension.
Transférez la suspension sur une plaque revêtue d’une matrice.
Incuber pour l’a
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