Différenciation de cellules souches pluripotentes humaines dans les neurones à l’aide de lentivirus modifiés

Traitez les cellules souches pluripotentes humaines adhérentes avec des lentivirus modifiés dans un réactif de transfection.

Le virus porte des gènes de résistance aux antibiotiques et du facteur de transcription neurogène, contrôlés par les éléments régulateurs et sensibles à la tétracycline.

Le réactif de transfection chargé positivement améliore la fusion virale et la libération de son contenu.

L’ARN viral se transcrit inversement dans l’ADN et s’intègre dans l’ADN des cellules souches, permettant l’expression d’éléments régulateurs qui produisent des protéines activatrices.

Ajoutez un milieu basal avec un dérivé de tétracycline, qui forme un complexe avec les protéines activatrices.

Ce complexe se lie à l’élément sensible à la tétracycline, favorisant l’expression des gènes et produisant les facteurs de transcription neurogènes qui induisent la différenciation des cellules souches en neurones.

Ajoutez un milieu basal avec un médicament antibiotique pour éliminer les cellules non transfectées.

Traitez les cellules avec une solution de détachement contenant des enzymes protéolytiques qui dégradent la matrice extracellulaire ou ECM et libèrent les cellules.

Retirez les enzymes et