Différenciation des cellules souches embryonnaires de souris en une population de neurones en réseau
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 6:04 min • July 8th, 2025
Ensemencez des cellules souches embryonnaires de souris dans une boîte à faible attachement contenant un milieu de différenciation.
Incuber en rotation pour faciliter l’agrégation cellulaire et la différenciation en une lignée neuronale.
Transférez les agrégats dans un tube et laissez-les se déposer par gravité. Jetez le support.
Remettre en suspension et transférer les agrégats dans la boîte d’origine contenant des milieux de différenciation complétés par de l’acide rétinoïque.
L’acide rétinoïque induit l’expression des gènes neuronaux, déclenchant la différenciation en cellules progénitrices neurales.
Transférez les agrégats dans un tube. Retirer le milieu et ajouter de la trypsine pour dissocier les agrégats.
Ajoutez un inhibiteur pour neutraliser la trypsine.
Pipeter à plusieurs reprises pour obtenir une suspension cellulaire homogène. Filtrez la suspension pour éliminer les agrégats.
Centrifugez et retirez le surnageant. Remettez les cellules en suspension dans le milieu.
Ensemencez les cellules sur une boîte recouverte de polymère pour faciliter l’adhésion des cellules.
Retirez le support. Ajoutez des milieux frais contenant des facteurs de croissance pour favoriser la matura
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