Génération d’une tranche de cerveau coronaire exposant les régions de l’amygdale à partir d’un cerveau de souris

Prenez un cerveau de souris dans un tampon glacé et retirez sa partie postérieure contenant le cervelet et la partie antérieure avec le cortex préfrontal médian, ou mPFC.

La partie centrale contient des régions amygdales qui traitent des émotions comme la peur et l’anxiété.

Déplacez la section du cerveau sur un papier filtre pour enlever l’excès de tampon.

Collez-le sur une scène et fixez un bloc de gélose derrière la section pour empêcher son mouvement lors du tranchage.

Placez cet étage dans une chambre de coupe de vibratome avec le tampon glacé.

Coupez la section pour obtenir une fine tranche de cerveau coronal.

Cela expose les régions de l’amygdale, qui contiennent des connexions synaptiques entre les neurones de l’amygdale et les projections des neurones mPFC qui régulent les réponses de l’amygdale.

Coupez la tranche en deux moitiés, chacune contenant une région de l’amygdale.

Ensuite, transférez-les dans une chambre d’interface contenant du liquide céphalo-rachidien artificiel oxygéné.

Récupérer les tranches à température physiologique pour maintenir la viabilité neuronale.

Après avoir obtenu le cerveau, utilisez un scalpel pour retirer le cervelet et la partie intérieure du cerveau, puis refroidissez la partie centrale du cerveau dans une solution de coupe glacée comme précédemment. Épongez le cerveau avec du papier filtre, puis collez-le à l’étage du vibratome.

Encore une fois, fixez un bloc de gélose supplémentaire derrière le cerveau pour plus de stabilité pendant le tranchage. Après avoir inséré la platine dans la chambre de coupe remplie d’une solution de coupe à 4 degrés Celsius, coupez des sections coronales de 320 microns à travers l’amygdale. Coupez-les en deux et rassemblez les sections dans la chambre d’interface comme précédemment.