Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:03 min • July 8th, 2025
Commencez par une plaque multi-puits à faible adhérence contenant des cellules souches pluripotentes induites par l’homme dans un corps embryoïde ou un milieu EB.
Centrifugeuse pour décanter les cellules. Incuber pour favoriser la prolifération et l’agrégation cellulaires, formant des corps embryoïdes.
Les régulateurs de la lignée cellulaire favorisent la différenciation cellulaire en progéniteurs myéloïdes.
Collectez ces EB et transférez-les sur le bord d’une matrice extracellulaire ou d’une plaque revêtue d’ECM.
Remplacez le milieu par un précurseur primitif de macrophage ou un milieu de différenciation PMP et agitez doucement. Incuber pour faciliter l’attachement des CE à l’ECM.
Remplacez la moitié du milieu et incubez.
Les facteurs de croissance hématopoïétiques poussent les progéniteurs myéloïdes à se différencier en précurseurs primitifs de macrophages, qui se séparent des EB et apparaissent dans le milieu.
Collectez ces PMP et faites tourner les cellules. Remettez-les en suspension dans un milieu de différenciation microgliale.
Ensemencez ces cellules dans une plaque multipuits recouverte de laminine et incuberez.
Les PMP utilisent les facteurs de différenciation et les nutr
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