Préparation de l’organe voméronasal de souris pour la section du vibratome

Commencez par un organe voméronasal de souris, ou VNO, situé à la base de la cloison nasale.

Celui-ci contient une fine couche de tissu abritant des neurones spéciaux qui détectent les phéromones.

Ajoutez une goutte de solution froide au VNO pour éviter le dessèchement.

Séparez chaque capsule VNO du tissu osseux et de l’os central.

Retirez la capsule cartilagineuse environnante.

Transférez le VNO sur une surface froide et ajoutez une goutte de solution froide pour minimiser les dommages aux tissus.

Plongez le VNO dans de l’agarose fondu, déplacez-le pour éliminer l’excès de solution, puis positionnez le VNO à la verticale. Placez-le sur de la glace pour solidifier l’agarose et encastrer le VNO.

Retournez l’agarose solidifiée et coupez-la à la forme souhaitée.

Fixez les blocs sur une plaque d’échantillon.

Maintenant, sectionnez le tissu à l’aide d’un vibratome.

Conservez les coupes dans une chambre oxygénée contenant une solution au pH ajusté afin de maintenir l’activité cellulaire pour des études ultérieures.

Transférez le VNO dans une petite boîte de Pétri sous un stéréomicroscope sur un pack de gel glaciaire, où les étapes restantes de la dissection doivent être effectuées. Ensui