Isolement et culture de cellules à partir de télencéphales dorsolatéraux d’embryons de souris

Prenez un embryon de souris dans un tampon et séparez le crâne pour isoler le cerveau.

Retirez les méninges, la couche membraneuse qui recouvre le cerveau.

Disséquez le cerveau pour séparer les hémisphères.

Isolez les télencéphales dorsolatéraux des hémisphères et transférez-les dans un tube.

Les télencéphales dorsolatéraux sont riches en neurones et en cellules progénitrices neurales.

Centrifugez et retirez le surnageant.

Ajouter une solution enzymatique. Les enzymes décomposent la matrice tissulaire, relâchant les cellules.

Introduisez un milieu de prolifération contenant du sérum. Les protéines sériques inhibent l’activité enzymatique.

À l’aide d’une pipette, dissociez mécaniquement le tissu, formant une suspension cellulaire.

Centrifugez et retirez le surnageant contenant des enzymes inactivées et des débris tissulaires.

Remettre les cellules en suspension dans le milieu de prolifération.

Transférez les cellules sur une microplaque recouverte d’un substrat de culture cellulaire.

Incuber pour que les cellules adhèrent au substrat. Le milieu facilite la prolifération des cellules progénitrices.

Commencez par prélever le cerveau de 5 à 10 embryons E14 dans une boîte de Pétri avec