Établissement d’une configuration de cellule entière grâce à la méthode du patch clamp

Commençons par une tranche de cerveau de souris immobilisée placée dans une chambre d’enregistrement de l’installation d’électrophysiologie remplie d’un liquide céphalo-rachidien artificiel pour maintenir la viabilité neuronale.

L’installation contient une micropipette d’enregistrement pré-assemblée remplie de solution cationique connectée à un amplificateur et à une unité de contrôle de pression.

À l’aide d’un microscope, localisez un neurone et placez la micropipette près de celui-ci.

Appliquez une pression d’air positive pour éliminer les débris.

Déplacez la micropipette vers le neurone jusqu’à ce qu’une fossette se forme sur la membrane, indiquant la proximité neuronale.

Appliquez une faible aspiration pour tirer un petit patch de membrane à l’intérieur de la micropipette.

Cela crée un joint étanche qui augmente la résistance de la micropipette, confirmant ainsi une étanchéité stable.

Maintenir le potentiel de la cellule à un potentiel de repos physiologique pour la stabilité cellulaire.

Ensuite, appliquez une aspiration brève et forte pour perturber la membrane du patch, établissant ainsi une connexion directe avec l’intérieur de la cellule.

Cette configuration de cellules ent