Stimulation transspinale à courant continu du motoneurone spinal d'un rat

Commencez par placer une éponge imbibée de solution saline sur la vertèbre thoracique-12 d’un rat préparé pour l’intervention.

Positionnez une électrode dessus pour la stimulation transspinale à courant continu ou tsDCS, qui consiste à appliquer un courant continu à travers la moelle épinière.

Pour mesurer l’enregistrement intracellulaire d’un motoneurone cible au cours de la tsDCS, insérez une microélectrode dans la moelle épinière à l’endroit de son origine.

Évaluez le potentiel de membrane de base du motoneurone et la fréquence des impulsions électriques pour vous assurer que la microélectrode est bien placée pour des mesures précises pendant la tsDCS.

Appliquez la tsDCS anodale, où les ions chargés positivement pénètrent dans le neurone lorsque le courant circule de l’anode à travers le tissu jusqu’à la cathode.

Appliquez la tsDCS cathodale, où les ions chargés négativement pénètrent dans le neurone lorsque le courant circule dans le sens inverse.

Enregistrer les changements dans les propriétés électriques du motoneurone pendant la tsDCS anodale et cathodale.

Pour placer les électrodes de stimulation transspinale à courant continu, placez une éponge imbibée de sérum physiologique sur la face dorsale de la vertèbre TH-12 et utilisez une manipulation fine pour presser l’éponge avec une électrode de stimulation transspinale active à courant continu. Ensuite, montez une microélectrode tirée sur mesure sur le micromanipulateur, permettant un mouvement de pas de 1 à 2 microns et un étalonnage stéréotaxique, et enfoncez une pointe de micropipette dans un patch sélectionné dans le PR à un angle médial-latéral de 15 à 20 degrés.

Pour enregistrer la membrane du motoneurone et les propriétés de décharge, en mode pont de l’amplificateur intracellulaire, stimulez les branches nerveuses respectives pour identifier le motoneurone sur la base de l’apparence tout ou rien du potentiel d’action antidromique.

Dans le mode de pince de courant discontinu de l’amplificateur intracellulaire avec un mode de commutation de courant de 4 à 8 kilohertz, utilisez des impulsions de courant dépolarisant intracellulaire de 0,5 milliseconde pour évoquer un potentiel d’action orthodromique dans un motoneurone.

Pour calculer la résistance d’entrée de la cellule, stimulez un motoneurone avec 40 impulsions courtes de 100 millisecondes de courant hyperpolarisant de 1 nanoampère. Pour déterminer la valeur de la rhéobase comme l’amplitude minimale du courant dépolarisant nécessaire pour provoquer un seul pic, stimulez un motoneurone avec des impulsions d’ondes carrées de 50 millisecondes à des amplitudes croissantes.

Ensuite, injectez des impulsions d’ondes carrées de 500 millisecondes de courant dépolarisant à des amplitudes croissantes par pas de 0,122 nanoampère pour évoquer des décharges rythmiques de motoneurones. Pour la stimulation transspinale à courant continu, commencez les procédures de polarisation par l’application transspinale d’un courant continu, tout en maintenant une pénétration stable du motoneurone.