Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:44 min • July 8th, 2025
Prenez une pipette de stimulation contenant des fluorophores rouges insensibles au calcium dans du liquide céphalo-rachidien artificiel, ou ACSF.
Positionnez la pipette près du neurone cible dans une tranche d’hippocampe.
Placez une pipette patch avec une électrode d’enregistrement baignée dans un électrolyte contenant des fluorophores indicateurs rouges insensibles au calcium et des fluorophores indicateurs de calcium vert près de la cible.
Appliquez une pression positive constante pour perturber brièvement la surface du tissu, indiquant la proximité de la cible.
Au fur et à mesure que la fossette se forme sur la membrane neuronale, relâchez la pression pour former un joint.
Appliquez une pression négative pour resserrer le joint.
Stabiliser le potentiel de membrane à une tension négative constante.
Continuez avec une pression négative pour briser la membrane, permettant aux électrolytes contenant des fluorophores de se propager dans le neurone.
Visualisez la fluorescence rouge de la colonne dendritique cible et alignez la pipette de stimulation à proximité de celle-ci.
Appliquez des impulsions électriques pour ouvrir les canaux calciques.
Utilisez la microscopie à deux photons po
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