Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:29 min • July 8th, 2025
Prenez une lamelle contenant une culture neuronale à motifs 1D.
Les neurones sont chargés d’un colorant indicateur de calcium, qui devient fluorescent lors de la liaison du calcium.
Transférez la lamelle dans une chambre d’imagerie au microscope à fluorescence contenant une solution d’enregistrement extracellulaire.
Assemblez un support avec deux fils-électrodes parallèles séparés par une distance.
Inversez le support et positionnez-le au-dessus de la culture neuronale avec les électrodes immergées dans la solution d’enregistrement.
Connectez les électrodes à un amplificateur. Appliquez une onde carrée bipolaire pulsée non CC pour générer un champ électrique unidirectionnel uniforme à travers les neurones sans causer de blessures.
Le champ électrique généré excite les neurones, déclenchant un potentiel d’action.
Le potentiel d’action se déplace le long de l’axone, activant les canaux calciques voltage-dépendants et provoquant un afflux de calcium dans la terminaison neuronale. De plus, les neurotransmetteurs sont libérés dans la synapse, facilitant la transmission synaptique.
Suite à l’afflux d’ions calcium, ces ions se lient au colorant intracellulaire et deviennent fluorescents,
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