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Prenez une souris anesthésiée avec le crâne exposé sur un cadre stéréotaxique. Cette souris a reçu une injection d’un virus exprimant la protéine mutante de séparation de l’actine dans le cortex cérébral droit.
Vissez une électrode électrocorticographique dans le site d’injection.
Marquez et percez le crâne perpendiculairement pour l’électrode postérieure, l’électrode de référence et les vis de maintenance.
Désinfectez les sites avec un antiseptique et bloquez-les pour éviter les saignements.
Insérez les vis et les électrodes aux mêmes angles de forage et appliquez du ciment dentaire dans l’espace entre elles.
Maintenant, utilisez de la lumière pour solidifier le ciment.
Couvrez la base des électrodes et des vis avec du ciment dentaire et appliquez à nouveau de la lumière. Fixez l’ensemble avec du ciment acrylique. Suturer la peau.
Connectez les fils dorés des électrodes aux broches du connecteur.
Couvrez l’espace de connexion avec du ciment acrylique.
Laissez la souris récupérer. Après la guérison, enregistrez les signaux du cortex cérébral en réponse à l’injection virale.
Pour l’implantation d’électrodes, utilisez une pince Kelly droite pour visser lentement une électrode électrocorticographique avec un fil d’or droit, dans l’axe vertical du trou dans lequel l’AAV a été injecté, en laissant au moins 2,5 millimètres de vis à l’extérieur du crâne pour minimiser les dommages à la dure-mère et au cortex cérébral.
À l’aide d’un stylo, marquez la position de l’électrode de référence à 2,6 millimètres latéralement droite par rapport à la ligne médiane et 0,7 millimètres en arrière par rapport au bregma, et la position de l’électrode électrocorticographique postérieure à 1,5 millimètre latéralement droite par rapport à la ligne médiane et 1,5 millimètre en avant par rapport à lambda, ainsi que les positions de trois vis de maintien sur l’hémisphère gauche sans coordonnées spécifiques, mais aussi éloignés que possible les uns des autres et des électrodes électrocorticographiques.
Utilisez la perceuse pour percer soigneusement le crâne perpendiculairement à la surface du crâne aux positions marquées des autres électrodes et vis, et lavez le crâne percé avec une solution de povidone iodée à 10 %.
Bloquez les trous avec de petits morceaux roulés d’essuyage délicat avant d’installer les vis pour éviter les saignements et la contamination, et utilisez une pince Kelly droite pour insérer les vis dans les trous de perçage au même angle que les trous ont été percés. Placez quelques petites gouttes de ciment dentaire au centre de l’espace en forme d’anneau à l’intérieur des vis. Après avoir couvert les yeux de l’animal, appliquez de la lumière pendant trois à cinq minutes pour solidifier le ciment et utilisez du ciment dentaire supplémentaire pour couvrir la base des électrodes électrocorticographiques et les vis d’ancrage pour former un contour en forme de couronne.
Après avoir appliqué trois à cinq minutes de lumière supplémentaires, remplissez le centre du montage avec du ciment acrylique et retirez les pinces chirurgicales.
Utilisez une suture synthétique en monofilament résorbable pour fermer la peau à l’avant et à l’arrière du montage afin que le crâne ne soit pas exposé, et utilisez une pince incurvée pour maintenir le connecteur au-dessus du montage afin d’aligner soigneusement les fils d’or des électrodes avec les broches du connecteur. Ensuite, soudez rapidement chaque extrémité de l’électrode à une seule broche de connecteur correspondante.
Après avoir retiré la souris du cadre, couvrez l’espace vide entre le connecteur et la tête avec le ciment acrylique, et après la pesée, placez la souris dans une cage propre avec un couvercle non grillagé sur un coussin chauffant.