Une approche non invasive pour étudier l’électrophysiologie des motoneurones chez les embryons de poisson-zèbre

Placez des embryons de poisson-zèbre génétiquement modifiés sous un stéréomicroscope et observez l’enroulement spontané de la queue déclenché par les motoneurones de la moelle épinière.

Les propriétés intrinsèques de ces neurones provoquent un afflux d’ions à travers les canaux sodiques, conduisant à une dépolarisation membranaire spontanée et à la génération de potentiels d’action qui se propagent aux muscles, déclenchant l’enroulement de la queue. Mesurez la fréquence d’enroulement.

Transférez certains embryons dans un inhibiteur des canaux sodiques pour inhiber l’afflux de sodium et évaluer la fréquence réduite de l’enroulement.

Montez les embryons non traités dans de l’agarose fondue, laissez l’agarose se solidifier pour restreindre les mouvements et observez au microscope à fluorescence.

Les motoneurones expriment un biocapteur avec un domaine de détection de tension lié à la membrane, ou VSD, fusionné à des fluorophores donneurs et accepteurs.

La dépolarisation modifie la conformation du VSD, rapprochant les fluorophores.

Lors de l’excitation, le donneur transfère de l’énergie à l’accepteur, provoquant une émission de fluorescence de l’accepteur.

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