Enregistrement optique de l’activité neuronale dans des tranches de cerveau colorées avec un colorant sensible au voltage

Prenez une tranche de cerveau de souris immobilisée colorée avec un colorant sensible au voltage ou VSD, des molécules fluorescentes qui s’intègrent dans la membrane neuronale et réagissent aux changements de potentiel membranaire.

Placez la tranche dans une chambre d’enregistrement.

Installez l’électrode de terre pour une référence de tension de base.

Ensuite, positionnez les électrodes de stimulation et d’enregistrement sur la tranche.

Appliquez une impulsion électrique.

L’impulsion stimule les neurones, déclenchant l’ouverture des canaux sodiques voltage-dépendants et l’afflux d’ions sodium, entraînant une modification du potentiel membranaire.

Cela induit un potentiel d’action, mesuré par l’électrode enregistreuse, et modifie les propriétés fluorescentes du VSD.

Exposez la tranche de cerveau à une longueur d’onde spécifique pour exciter le VSD et déclencher l’émission de fluorescence.

Après la stimulation, les canaux sodiques se ferment tandis que les canaux potassiques voltage-dépendants s’ouvrent, favorisant l’efflux d’ions potassiques.

Cela modifie à nouveau le potentiel de la membrane et, par conséquent, modifie la fluorescence du VSD.

Enregistrez la fluorescence en temps r