Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 6:22 min • July 8th, 2025
Prenez la tête coupée d’une souris génétiquement modifiée. L’épithélium olfactif de son nez contient des neurones sensoriels olfactifs, ou OSN, avec des récepteurs olfactifs marqués au fluorophore.
Retirez la peau et disséquez la tête pour isoler le septum avec l’épithélium olfactif attaché.
Séparez et fixez l’épithélium dans une chambre d’enregistrement.
À l’aide d’un microscope à fluorescence, détectez les récepteurs marqués pour cibler le bouton dendritique des OSN.
Apportez une pipette d’enregistrement avec une solution intracellulaire contenant de la nystatine, un antibiotique perforant la membrane.
Appliquez une pression positive pour éviter le colmatage de la pipette. Insérez la pipette dans l’épithélium et approchez-vous d’un OSN.
Passez à la pression négative, formant un joint avec la membrane cellulaire. Appliquez du courant pour maintenir la membrane au potentiel de repos.
La nystatine perfore la membrane, ce qui permet de mesurer les courants ioniques intracellulaires.
Positionnez une pipette contenant un stimulant olfactif à proximité de l’OSN. Libérez le stimulant, qui se lie aux récepteurs d’odeur, déclenchant l’ouverture des canaux ioniques pour permettre l’afflux d
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