Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
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Commencez avec une souris se déplaçant librement avec une canule à fibre optique implantée.
Connectez une extrémité d’un cordon de raccordement à fibre optique à la canule et l’autre extrémité à une source de lumière d’excitation.
La souris exprime un indicateur de calcium génétiquement codé (GECI) dans la zone hypothalamique latérale, ou neurones LHA.
La fibre optique implantée entre en contact avec la région latérale de l’habenula, ou LHb, où se terminent les axones du LHA.
Excitez le GECI à sa longueur d’onde d’excitation optimale et enregistrez le signal de base.
Maintenant, appliquez des bouffées d’air répétées sur la souris pour susciter une réponse de stress aversive.
Ce stimulus déclenche des potentiels d’action dans les terminaisons axonales du LHA, ouvrant des canaux calciques voltage-dépendants et permettant l’afflux de calcium.
Les ions calcium intracellulaires se lient au GECI, induisant un changement de conformation qui augmente l’émission de fluorescence verte.
Visualisez le signal optique.
L’augmentation de la fluorescence en réponse aux bouffées d’air chez la souris confirme le rôle de la voie LHA-LHb dans la transmission de signaux aversifs.
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