Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:08 min • July 8th, 2025
Commencez par perfuser un liquide céphalo-rachidien artificiel aéré ou un LCRa sur une grille de maille dans une chambre de perfusion.
Transférez une tranche de cerveau contenant des neurones exprimant des protéines fluorescentes et ancrez-la avec un appareil câblé en platine.
Faites pivoter la grille de maillage pour l’alignement.
Abaissez la sonde multicanaux vers la tranche.
Ajustez le cube de filtre pour la visualisation des protéines fluorescentes.
Tournez la tranche pour aligner la sonde.
Ajustez la hauteur de la sonde sous la surface du tissu.
Maintenant, perfuser l’aCSF et se concentrer sur les neurones marqués par fluorescence.
À l’aide d’un objectif haute puissance, concentrez-vous sur le tissu et ajustez la lumière d’excitation.
Utilisez un filtre de lumière approprié pour observer la fluorescence dans les neurones.
Ajustez la lentille de l’objectif pour créer de l’espace pour la pipette patch et appliquez une pression positive.
Ensuite, positionnez la pipette près du neurone pour former une fossette membranaire.
Enfin, appliquez une faible aspiration pour créer un joint de membrane, suivie d’une forte aspiration pour briser la membrane et obtenir des enregistrements éle
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