Enregistrement du potentiel de champ local des deux hémisphères du cerveau de la souris

Commencez avec une souris anesthésiée avec la tête fixée dans un cadre stéréotaxique.

Rasez et stérilisez le cuir chevelu.

Faites une incision et retirez le tissu résiduel pour exposer le crâne.

Nettoyez le crâne avec un désinfectant et percez des trous aux endroits cibles.

Retirez la couche externe du cerveau.

Insérez des microélectrodes remplies d’une solution ionique dans les trous à l’angle souhaité.

Abaissez les deux microélectrodes dans les coordonnées cibles du cerveau.

Testez la résistance des électrodes et ajustez les paramètres d’enregistrement pour garantir l’acquisition fiable du potentiel de champ local ou des données LFP.

LFP reflète les changements de tension résultant de l’activité collective de nombreux neurones au sein d’une petite région.

Enregistrez les LFP des deux hémisphères pour comparer l’activité neuronale entre eux.

Avant la chirurgie, confirmez la profondeur de l’anesthésie de la souris en effectuant un pincement de la queue ou des orteils avec des pinces. Ensuite, placez la souris dans un appareil stéréotaxique et fixez sa tête. Appliquez une pommade sur les deux yeux pour les garder humides.

Ensuite, rasez la tête et stérilisez la zone. Faites une petite incision de 12 à 15 millimètres au milieu de la zone rasée. À l’aide d’une pince, éloignez doucement le cuir chevelu de la ligne médiane. Ensuite, séparez doucement la peau et retirez le tissu résiduel.

Nettoyez le crâne à l’aide de cotons-tiges enduits de peroxyde d’hydrogène. Sous un stéréomicroscope, percez deux petits trous de rayons de 1 à 1,5 millimètre sur les côtés gauche et droit du crâne pour permettre l’insertion des microélectrodes d’enregistrement dans les régions M2.

Avec précaution, retirez la dure-mère à l’aide d’une aiguille en tungstène, puis insérez deux microélectrodes d’enregistrement séparées remplies de chlorure de sodium à 0,5 molaire dans les trous à un angle de 60 degrés à l’aide de micromanipulateurs mécaniques.

Pour l’enregistrement LFP, abaissez lentement les électrodes de verre gauche et droite aux coordonnées M2. Pour le contrôle de la qualité, testez la résistance de chaque électrode à l’aide de l’amplificateur différentiel. Ensuite, réglez le processus d’enregistrement sur 0,1 Hertz passe-haut et 1 000 Hertz passe-bas avec amplification 1 000 fois. Collectez les données LFP brutes numérisées dans un état stable pendant au moins 60 secondes, la souris respirant uniformément à raison de deux respirations par seconde sous anesthésie.