Analyse du comportement en sommeil chez la souris à l’aide d’enregistrements d’électroencéphalogramme et d’électromyogramme

Fixez une souris anesthésiée sur un cadre stéréotaxique.

Désinfectez la peau rasée, couvrez la souris avec un drapé et faites une incision médiane pour exposer le crâne.

Percez deux trous dans le crâne à des coordonnées stéréotaxiques spécifiques.

Préparez une unité d’électrode d’enregistrement avec un connecteur à quatre broches relié à des fils en acier inoxydable.

Utilisez deux fils avec des vis comme électroencéphalogramme ou électrodes EEG pour mesurer l’activité électrique du cerveau.

Utilisez les deux autres fils comme électromyogramme ou électrodes EMG pour mesurer l’activité électrique musculaire.

Vissez les électrodes EEG dans les trous et fixez l’ensemble d’électrodes au crâne.

Insérez les électrodes EMG dans les muscles du cou.

Fermez l’incision avec des sutures et laissez la souris récupérer.

Transférez la souris dans une chambre d’enregistrement insonorisée.

Connectez l’ensemble d’électrodes à un câble d’enregistrement et reliez-le à un amplificateur.

Enregistrez les signaux EEG et EMG pour analyser les différents stades du sommeil et l’éveil chez la souris.

Avant de commencer, stérilisez tous les outils chirurgicaux dans un stérilisateur à billes chaudes. Une fois que la souris est confirmée anesthésiée par un pincement de l’orteil, rasez les poils de la tête et du cou.

Ensuite, fixez la souris au cadre stéréotaxique et fixez la tête entre les deux barres d’oreille. Ensuite, appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux pour prévenir la sécheresse. Procédez au nettoyage de la peau rasée avec des gommages à base d’alcool et d’iode.

Ensuite, coupez le long de la ligne médiane avec un scalpel pour exposer le crâne et fixez la peau sur le côté à l’aide de clips pour maintenir la zone chirurgicale ouverte. À l’aide d’une fraise en carbure avec un foret de 0,8 millimètre, faites deux trous. Mettez un trou sur la zone corticale frontale. Placez le deuxième trou sur la zone pariétale de l’hémisphère droit.

Ensuite, à l’aide d’un tournevis de bijoutier, vissez les vis d’enregistrement EEG en acier inoxydable dans les trous. Insérez les vis en seulement deux à deux tours et demi pour obtenir un positionnement épidural sur le cortex. Les vis ne doivent pas bouger une fois insérées. C’est très important.

Maintenant, fixez l’ensemble d’électrodes avec les broches vers le haut jusqu’au crâne. Les électrodes doivent être fixées droites. Utilisez un coton-tige pour aider à sécuriser la position des électrodes et collez l’électrode à l’aide de cyanoacrylate, suivi de ciment dentaire.

Ensuite, faites de petits trous dans le trapèze et insérez l’électrode EMG dans ces trous. Ensuite, suturez la peau avec du fil de soie de 0,1 millimètre de diamètre. Retirez maintenant la souris du cadre stéréotaxique et placez-la sur un coussin chauffant.

Donnez à la souris des injections intrapéritonéales d’ampicilline et de méloxicam, et surveillez la souris jusqu’à ce qu’elle retrouve sa décubitus sternal. Ensuite, hébergez la souris seule.

Une semaine après l’implantation des électrodes, transférez la souris dans une cage expérimentale dans une chambre d’enregistrement insonorisée. Fixez l’ensemble d’électrodes EEG/EMG sur la souris à un câble d’enregistrement connecté à une bague collectrice.

Connectez le câble du convertisseur AD à un amplificateur de filtre de signal EEG/EMG connecté à la bague collectrice. Utilisez un convertisseur AD pour convertir le signal en un signal numérique de 128 hertz et enfin, enregistrez le signal sur un ordinateur.

Habituez la souris pendant deux à trois jours dans la chambre d’enregistrement. Démarrez le logiciel d’enregistrement EEG/EMG. Pour commencer, cliquez sur l’onglet d’informations sur le fichier de données et cliquez sur la case à côté du nom du fichier. Entrez un nom de fichier et cliquez sur Enregistrer. Ensuite, dans l’onglet des conditions d’enregistrement, sélectionnez tous les canaux EEG/EMG qui doivent être enregistrés. Sélectionnez également la fréquence d’échantillonnage sous cet onglet.

Maintenant, dans l’onglet d’informations sur la chaîne, vérifiez si les chaînes sélectionnées s’affichent correctement. Une fois confirmé, démarrez l’enregistrement en sélectionnant d’abord l’onglet de réglage de la minuterie. Ensuite, cliquez sur Surveiller pour afficher l’EEG et l’EMG. Si les signaux s’affichent correctement, réglez l’heure de l’horloge pour le début et la fin de l’enregistrement dans la zone principale de la minuterie. Ensuite, cliquez sur le bouton du moniteur pour démarrer l’enregistrement.