Test des connexions monosynaptiques à l’aide de tétradotoxine et de canaux sodiques résistants aux tétrodotoxines

Commencez par une installation d’électrophysiologie contenant une mouche transgénique immobilisée avec un cerveau exposé.

Placez une micropipette d’enregistrement près d’un neurone postsynaptique connecté à un neurone présynaptique co-exprimant des canaux sodiques résistants à la tétrodotoxine et des canaux sensibles à la lumière rouge, et à un interneurone avec des canaux sodiques sensibles à la tétrodotoxine.

Appliquez une légère aspiration sur la micropipette pour former un joint étanche avec la membrane neuronale.

Ensuite, appliquez une forte aspiration pour perturber la membrane.

Maintenir un potentiel cellulaire constant. Introduire la tétrodotoxine, qui bloque les canaux sodiques dans l’interneurone, empêchant la transmission du signal de l’interneurone au neurone postsynaptique.

Cependant, les canaux sodiques résistants aux tétrodotoxines ne sont pas affectés, ce qui permet aux ions sodium de pénétrer dans le neurone présynaptique.

Illuminez la mouche avec les impulsions de lumière rouge.

Cela stimule les canaux sensibles à la lumière, permettant aux cations d’affluer et d’activer le neurone présynaptique.

Ce neurone présynaptique transmet directement un signal au neurone p