Procédé de micro-réseau d’entraînement pour l’enregistrement électrophysiologique de plusieurs régions du cerveau

Fixez un rat anesthésié dans un cadre stéréotaxique. Rasez et désinfectez le cuir chevelu, puis faites une incision pour exposer le crâne.

Percez des trous au-dessus du bulbe olfactif pour implanter des électrodes d’enregistrement. Percez au-dessus du cortex frontal pour implanter des électrodes de référence qui acquièrent les signaux d’activité cérébrale de base.

Insérez des vis d’ancrage autour de l’hippocampe et créez un grand trou au-dessus de la région.

Positionnez un réseau de micro-entraînement intégratif avec sa canule contenant des électrodes d’enregistrement au-dessus du trou.

Utilisez une solution gélifiante pour fixer le réseau. Appliquez du ciment dentaire qui adhère aux vis d’ancrage et assure la stabilité mécanique.

Connectez le réseau aux électrodes implantées pour un enregistrement simultané à partir de plusieurs régions du cerveau. Isolez les connexions pour améliorer la qualité du signal.

Laissez le rat récupérer, puis avancez les électrodes pour entrer en contact avec le cerveau et laissez les signaux se stabiliser.

Le rat avec les électrodes implantées est prêt à enregistrer les signaux électriques du cerveau.

Fixez le rat à un appareil stéréotaxique, puis rasez et nettoyez le crâne, et commencez l’implantation du réseau par une incision de 3 centimètres le long de la ligne médiane, du point entre les yeux et le cou. À l’aide d’une perceuse à grande vitesse, faites une paire de craniotomies circulaires d’un diamètre de 0,7 à 1,0 millimètre au-dessus du bulbe olfactif, qui est de 11,0 millimètres en avant et d’un millimètre bilatéral par rapport au bregma.

Ensuite, implantez les deux électrodes BR juste assez profondément pour que les extrémités des vis entrent en contact avec le cerveau, qui se trouve à environ 2 millimètres de profondeur. Utilisez entre six et huit tours complets de la vis.

Ensuite, faites une autre paire de craniotomies au-dessus du cortex frontal, 2,7 millimètres en avant et 2,7 millimètres bilatérales au bregma. Dans ces trous, fixez les deux électrodes de référence à la terre de manière à ce qu’elles entrent également en contact avec le cerveau, à environ 1,6 millimètre de profondeur. Cela prend quatre à cinq tours complets de la vis.

Maintenant, prévoyez une grande craniotomie circulaire d’un diamètre d’environ 2,0 millimètres au-dessus de l’hippocampe, 3,8 millimètres en arrière et 2,5 millimètres bilatéraux au bregma. Ensuite, faites six à huit trous de 1,0 millimètre dans la zone qui entourera la craniotomie.

Dans chacun de ces trous, implantez les vis d’ancrage. Ensuite, faites la craniotomie prévue entre les vis. Au-dessus du grand trou, positionnez le réseau de micro-entraînement intégratif de manière à ce que l’extrémité de la canule soit juste au-dessus de la grande craniotomie.

Remplissez l’espace entre l’extrémité de la canule et la surface du cerveau avec environ 100 microlitres d’époxy en deux parties. Au cours des cinq prochaines minutes, laissez le mélange se transformer en un gel transparent. Ensuite, couvrez la canule, les électrodes BR, les électrodes de référence à la terre et les vis d’ancrage avec du ciment dentaire.

Appliquez environ cinq millimètres de ciment sans couvrir les extrémités ouvertes des électrodes de référence BR ou de masse. Maintenant, soudez toutes les extrémités ouvertes des électrodes à l’endroit où elles se connectent à la carte. Ensuite, couvrez la partie inférieure du réseau de micro-entraînement intégratif et tous les fils d’électrode avec du ciment dentaire.

Il est important de couvrir complètement les fils d’électrodes afin que le rat ne puisse pas les gratter après l’implantation. Laissez maintenant le rat récupérer. Après avoir repris suffisamment de conscience pour maintenir la position couchée sternale, hébergez-le seul sans aucun compagnon de cage et donnez-lui un accès libre à la nourriture et à l’eau.

Après l’opération, faites avancer progressivement les tétrodes en avançant les vis quotidiennement. Une fois que les tétrodes sont adjacentes aux zones cérébrales cibles, laissez-les se stabiliser pendant plusieurs jours pendant lesquels les signaux se stabiliseront.