Enregistrement des courants synaptiques à la jonction neuromusculaire larvaire de la drosophile

Placez une boîte de Pétri contenant une larve de drosophile disséquée avec les muscles et les branches nerveuses exposés sur la platine du microscope.

Insérez une électrode de référence dans une solution de bain à l’intérieur de la boîte de Pétri.

Remplissez une électrode d’enregistrement avec une solution isotonique.

À l’aide d’un micromanipulateur, positionnez cette électrode sur un muscle abdominal innervé par des motoneurones.

Placez l’extrémité de l’électrode sur un bouton synaptique, une structure à l’extrémité de l’axone contenant des neurotransmetteurs.

Enregistrez en continu les courants jonctionnels excitateurs miniatures ou mEJCs, qui sont des réponses à la libération spontanée de neurotransmetteurs.

La plage correcte d’amplitude mEJC confirme le bon positionnement de l’électrode.

Ensuite, placez une électrode de stimulation près de l’axone qui innerve le muscle ciblé.

Appliquez une pression négative pour tirer l’axone à l’intérieur de l’électrode.

Augmentez progressivement le courant de stimulation pour induire un potentiel d’action.

Cela déclenche la libération par l’axone de neurotransmetteurs à la jonction neuromusculaire, qui sont enregistrés sous forme de courants