Enregistrements simultanés d’électroencéphalographie et de potentiel de champ local chez un rat anesthésié

Fixez un rat anesthésié à un cadre stéréotaxique avec son crâne exposé.

Le rat a un trou de bavure dans le crâne avec la dure-mère percée, une incision au cou et des électrodes stimulantes attachées à ses coussinets de moustaches.

Fixez une électroélectro-encéphalogramme, ou EEG, une électrode d’araignée enduite de pâte conductrice sur le crâne, en gardant le trou de bavure dégagé.

L’électrode d’araignée mesure l’EEG de surface, reflétant l’activité neuronale globale de la zone corticale située en dessous.

Montez une microélectrode linéaire multicanaux sur un micromanipulateur.

Insérez la microélectrode dans le cortex cérébral à travers le trou de bavure jusqu’à une profondeur de 1500 micromètres.

La microélectrode mesure le potentiel de champ local, ou LFP, reflétant l’activité neuronale corticale.

Placez les électrodes de référence EEG et LFP à l’intérieur de l’incision du cou.

Connectez les électrodes d’enregistrement et de référence à un préamplificateur relié à une unité d’acquisition de données.

Appliquez des stimuli électriques sur les coussinets de moustaches et ajustez la profondeur des microélectrodes pour maximiser l’amplitude LFP évoquée. Enregistrez les signaux EEG et LFP co-localisés.

Dans cette procédure, nettoyez et séchez le crâne entourant le trou de la bavure à l’aide d’un coton-tige. Appliquez soigneusement la pâte EEG conductrice sur un côté plat d’une électrode d’araignée EEG. Laissez un petit trou libre de pâte EEG sur l’électrode araignée pour permettre à une microélectrode multilaminaire de passer à travers le trou sans entrer en contact avec la pâte et l’électrode araignée.

Alignez l’électrode de l’araignée avec le trou de bavure dans le crâne avec la pâte EEG face au crâne. Appuyez délicatement l’électrode de l’araignée sur le crâne, en établissant un contact ferme avec le crâne via la pâte EEG.

Retirez toute pâte masquant le trou de la bavure à l’aide d’une aiguille sur une seringue et retirez l’excès de pâte EEG au-delà de la périphérie de l’électrode d’araignée, de sorte que le contact entre l’électrode d’araignée et le crâne soit limité spatialement à la taille de l’électrode. Ensuite, étalez de la pâte EEG sur l’électrode de référence pour l’EEG et placez-la solidement à l’intérieur de l’incision à l’arrière du cou du rat.

Ensuite, connectez les électrodes EEG au préamplificateur via un séparateur de signal passif pour les signaux à faible impédance. À ce stade, testez la résistance de la sonde EEG pour vous assurer qu’elle est inférieure à cinq kiloohms. Si ce n’est pas le cas, ajoutez plus de pâte EEG et assurez-vous que l’électrode de l’araignée entre bien en contact avec le crâne.

Par la suite, montez un bras micromanipulateur sur le cadre stéréotaxique. Connectez une microélectrode linéaire à 16 canaux à un étage de tête aiguë à 16 canaux fixé solidement sur le bras du micromanipulateur. Ensuite, étalez de la pâte EEG sur l’électrode de référence de la microélectrode, puis placez-la solidement à l’intérieur de l’incision à côté de l’électrode de référence pour l’EEG. Ajustez l’angle du bras du micromanipulateur de manière à ce que la microélectrode soit perpendiculaire à la surface corticale.

Maintenant, abaissez la microélectrode sous un microscope de sorte que la pointe de la microélectrode soit dirigée vers la minuscule ouverture au fond du trou de bavure, jusqu’à ce que l’électrode la plus haute pénètre à peine la surface corticale. Des précautions doivent être prises pour éviter de forcer la microélectrode sur la surface de la dure-mère, car cela casserait l’électrode.

Insérez la microélectrode à la surface corticale à une profondeur de 1500 micromètres. Microajustez la profondeur en appliquant un train de stimuli sur le coussin de moustaches et en observant le LFP évoqué à 16 canaux sur un moniteur de PC. Tournez avec précaution le bouton de l’axe z du micromanipulateur jusqu’à ce que l’amplitude la plus élevée de la LFP évoquée se produise, car celle-ci coïncide avec la couche 4 dans le cortex.