Technique de patch clamp automatisée guidée par l’image pour l’étude des neurones dans des tranches de cerveau
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:41 min • July 8th, 2025
Commencez par une tranche de cerveau immobilisée dans une chambre d’enregistrement.
À l’aide du logiciel contrôlé par caméra d’un microscope, faites la mise au point sur la zone cible
Allumez la lumière d’excitation et prenez plusieurs photos à différentes profondeurs.
Le logiciel détecte les coordonnées des cellules marquées par fluorescence.
Positionnez maintenant la pipette patch remplie de solution contenant l’électrode d’enregistrement dans la chambre.
Utilisez un logiciel approprié pour calibrer les commandes de position.
En cas de grossissement élevé, recalibrez les commandes pour cibler précisément la cellule marquée par fluorescence.
Sélectionnez les coordonnées de la cellule cible.
Démarrez l’abaissement automatique de la pipette patch.
L’ordinateur surveille la résistance via l’électrode. Appliquez une pression négative, une augmentation de la résistance due au contact de la pipette avec la membrane cellulaire indique la formation de gigaseal.
Ensuite, le logiciel diminue encore la pression pour percer la membrane cellulaire et obtenir une configuration de patch de cellules entières.
Dans cette étape, placez une tranche de cerveau au centre de la chambre d’enregistrement
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