Évaluation de la fonction mitochondriale dans les cellules endothéliales vasculaires cérébrales

Commencer avec des cellules endothéliales vasculaires cérébrales ou CVE dans des milieux de culture.

Les cellules CVE sont des cellules à haute consommation d’énergie qui tapissent les vaisseaux sanguins du cerveau et sont essentielles à la physiologie du cerveau.

Placez les cellules dans une plaque de culture cellulaire à flux extracellulaire. Incuber pour l’attachement cellulaire.

Remplacer le milieu de culture par un milieu d’essai de flux extracellulaire ayant le pH souhaité.

Incuber sans dioxyde de carbone pour maintenir le pH.

Ensuite, prenez une cartouche de capteur de flux extracellulaire, qui comprend des capteurs et une plaque inférieure.

Ajoutez une solution d’étalonnage à la plaque et incubez sans dioxyde de carbone pour hydrater les capteurs.

Ces capteurs peuvent mesurer les changements de concentration d’oxygène dans l’environnement extracellulaire, indiquant l’activité mitochondriale.

Ensuite, chargez la cartouche dans un bioanalyseur et calibrez les capteurs.

Remplacez la plaque inférieure par la plaque contenant les cellules.

Mesurer la fonction mitochondriale des cellules CVE.

Après le nombre approprié de sous-cultures, ensemencez 1,6 x 10⁴ cellules dans 80 microl