Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:34 min • July 8th, 2025
Prenez une tranche coronale de l’organe voméronasal chimiosensoriel d’une souris transgénique exprimant des neurones sensoriels marqués par fluorescence.
L’épithélium sensoriel contient ces neurones marqués, qui sont exposés à la lumière reliée à la cavité nasale pour détecter les signaux chimiques.
Fixez la tranche dans une chambre d’imagerie à l’aide d’un ancrage de tranche.
Transférez la chambre dans une configuration d’enregistrement et écoulez une solution extracellulaire oxygénée pour maintenir la viabilité des tissus.
Placez une pipette de perfusion près de la tranche pour introduire des stimuli chimiques et une pipette d’enregistrement sur les neurones sensoriels.
À l’aide d’un microscope à fluorescence, identifiez les neurones marqués.
Appliquez une pression positive pour éviter le colmatage de la pipette et approchez-vous d’un neurone jusqu’à ce qu’une fossette se forme sur la membrane.
Passez en pression négative, en aspirant la membrane dans la pipette.
Appliquer une aspiration pour rompre la membrane et établir une continuité avec le cytoplasme, appelée patch clamp à cellules entières, permettant l’introduction de stimuli chimiques et l’enregistrement des signaux élect
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