Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 7:22 min • July 8th, 2025
Prenez des segments de l’artère cérébrale postérieure d’une souris.
Incuber avec une solution enzymatique pour dégrader la matrice tissulaire, en relâchant les cellules.
Remplacez la solution par un tampon, puis transférez un segment dans une chambre d’enregistrement.
Dissocier mécaniquement les couches de tissu conjonctif et de cellules musculaires lisses, isolant le tube endothélial sous-jacent.
Fixez le tube, retirez les couches dissociées et ajoutez un tampon physiologique.
Placez la chambre dans un système d’enregistrement avec un flux tampon continu.
Introduisez un indicateur de calcium fluorescent qui pénètre dans les cellules endothéliales, puis insérez une électrode d’enregistrement dans une cellule.
Administrer un médicament qui déclenche l’afflux d’ions calcium et induit une signalisation en aval pour la libération de calcium à partir du réticulum endoplasmique.
L’indicateur se lie au calcium et, lors de l’excitation, émet une fluorescence.
L’augmentation du calcium active les canaux potassiques dépendants du calcium, provoquant un écoulement de potassium et modifiant le potentiel membranaire.
Enregistrez simultanément les changements de calcium intracellulaire via le si
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