Test de la fonction nerveuse sensorielle dans un modèle de souris dénervée chirurgicalement

Commencez avec une souris anesthésiée avec la peau dorsale exposée. Désinfectez la zone et couvrez-la.

Faites une incision médiane du cou jusqu’à juste au-dessus de la queue.

Tirez sur la peau du côté gauche pour créer un lambeau cutané et exposer les tissus sous-jacents.

Placez la souris sous un microscope et localisez les nerfs sensoriels.

Tirez et retirez soigneusement ces nerfs sans perturber les vaisseaux sanguins.

Humidifiez le tissu et retirez les nerfs restants du lambeau cutané, créant ainsi une zone dénervée.

Sur le côté droit, laissez les nerfs intacts comme contrôle. Suturez l’incision cutanée.

Laissez la souris récupérer.

Pour évaluer la dénervation stable plusieurs semaines après la chirurgie, utilisez la même souris dénervée avec une peau dorsale rasée.

À l’aide d’une aiguille, piquez la zone de contrôle, générant une stimulation mécanique.

Cela excite les nerfs sous-jacents, envoyant un signal au cerveau et provoquant la réponse de la souris.

Cependant, le fait de piquer la zone dénervée ne génère pas de réponse, confirmant le rôle des nerfs sensoriels.

Anesthésier l’animal. Rasez toute la peau dorsale et nettoyez la zone comme pour la procédure de biopsie. Maintenant, faites une incision à l’aide d’un scalpel stérile le long de la ligne médiane dorsale de la base du cou, jusqu’à environ un demi-centimètre au-dessus de la queue. À l’aide d’une pince émoussée stérile, réfléchissez doucement la peau du côté gauche loin du flanc, pour visualiser le tissu sous-jacent des coussinets adipeux scapulaires près du cou jusqu’à juste au-dessus du membre postérieur.

Maintenant, identifiez les nerfs cutanés dorsaux à l’aide d’un microscope optique disséquant. Ceux-ci se présentent sous la forme de brins blancs qui se déplacent caudalement à travers le fascia translucide de la paroi du tronc avant de faire des courbures brusques et de pénétrer dans le tissu conjonctif lâche sous la peau. Ensuite, à l’aide d’une pince ultrafine, retirez les nerfs exclusivement du côté gauche de l’animal situés aux sites anatomiques T3 à T12 en les arrachant de l’endroit où leurs segments se plient au niveau de la paroi du tronc jusqu’à leurs sites d’entrée dans la peau.

Orientez la pince verticalement et saisissez les nerfs à environ un demi-centimètre sous leurs sites de courbure. Une fois saisi, tirez vers le haut pour faire étirer le nerf et séparez-le des tissus environnants pour les retirer. Évitez d’endommager les vaisseaux sanguins adjacents. Assurez-vous de garder le tissu humide tout au long de la procédure en appliquant périodiquement des gouttes de solution saline stérile à 0,9 %.

Continuez à enlever tous les nerfs qui s’étendent de la paroi du tronc à la peau, mais ne perturbez pas les nerfs à l’intérieur du fascia dense de la paroi du tronc. Ensuite, retirez tous les nerfs du lambeau de peau exposé. Ces fibres comprennent les branches distales des nerfs cutanés dorsaux et apparaissent sous la forme de brins de ramification blancs situés sporadiquement dans le tissu conjonctif du côté dermique du lambeau de peau.

Pour retirer ces fines branches, positionnez la pince à peu près parallèlement à la surface dermique, saisissez les nerfs et pincez vers le haut. Retirez tous les nerfs visibles de cette façon. Ne percez pas les vaisseaux sanguins et la peau.

Au cours de cette étape, il est important d’éviter la rupture des vaisseaux sanguins voisins. Si vous trouvez un nerf avec un vaisseau sanguin adjacent, suivez-le ventralement jusqu’à une zone où il n’y a pas de vaisseau adjacent, et retirez-le en l’épilant.

Maintenant, réfléchissez franchement la peau sur le côté droit de l’incision médiane dorsale, mais n’enlevez aucun nerf. Il s’agira d’un contrôle simulé controlatéral. Enfin, suturez l’animal et surveillez postopératoirement comme auparavant. Plus tard, pour confirmer la perte stable des nerfs des semaines après la chirurgie, piquez doucement la zone dénervée à l’aide d’une aiguille hypodermique stérile. Notez si l’animal réagit généralement en frissonnant ou en tournant la tête. Si la zone de la peau a été dénervée de manière stable, l’animal ne présentera que peu ou pas de réponse.