Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:54 min • July 8th, 2025
Placez une lamelle contenant des cellules rénales embryonnaires exprimant des canaux ioniques dépendants de la lumière et une protéine rapporteure fluorescente sur une chambre de mesure appliquée au silicium. Fermez-le et ajoutez un tampon externe.
Placez cette chambre sous un microscope. Placez une électrode de bain remplie d’agar. Perfuser avec un tampon pour éliminer les milieux résiduels et les cellules mortes.
À l’aide d’un filtre de fluorescence, identifiez et concentrez-vous sur la cellule cible.
Fixez une pipette patch à un micromanipulateur. Appliquez une pression pour éviter le colmatage et approchez-vous de la cellule.
Positionnez la pipette près de la cellule et relâchez la pression positive pour former un patch membranaire à l’extrémité.
Après avoir formé le patch de membrane, appliquez une pression négative pour rompre la membrane.
Appliquez une lumière d’une longueur d’onde spécifique pour ouvrir les canaux ioniques. Le mouvement des ions est enregistré sous forme de changement de tension par l’électrode.
Pour commencer, scellez la chambre de mesure avec du silicone pour éviter les fuites du tampon externe. Ensuite, placez une lamelle dans la chambre et fermez-la. Re
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