Impact de la stimulation en courant continu sur les crises d’épilepsie évoquées dans des tranches de cerveau de souris

Prenez une tranche de cerveau de souris contenant le thalamus médial, ou MT, projeté vers le cortex cingulaire antérieur, ou ACC.

Fixez la tranche dans une chambre à multiélectrodes perfusée avec de l’aCSF oxygéné pour enregistrer les signaux électriques.

Placez des électrodes positives et négatives et appliquez une stimulation à courant continu, ou DCS, générant un champ électrique à travers la tranche.

Désactivez le DCS et placez une électrode dans le MT. Délivrez un stimulus pour évoquer des potentiels d’action dans les neurones thalamiques, déclenchant la libération de neurotransmetteurs.

Les neurotransmetteurs déclenchent l’afflux d’ions dans les neurones ACC et génèrent des signaux électriques, appelés réponses synaptiques évoquées par stimulation.

Réactivez le DCS pour surveiller ses effets sur les réponses synaptiques ACC.

Ensuite, désactivez le SCD et introduisez des médicaments provoquant des crises.

Les médicaments augmentent l’excitabilité neuronale, ce qui fait que le stimulus thalamique produit des rafales continues de signaux dans l’ACC, appelées crises d’épilepsie évoquées.

Enfin, réactivez le DCS pour évaluer son effet sur les crises en mesurant la réduction de l’amplitude et de la durée des crises.

Dans cette procédure, assurez-vous de générer des champs électriques uniformes en faisant passer des courants entre deux fils d’argent parallèles enrobés de chlorure d’argent qui sont placés à l’intérieur de la chambre MEA. S’il n’y a pas de problème, le DCS doit rester entre 0,5 et 2 milliampères.

Ensuite, éteignez le DCS et stimulez le thalamus avec une électrode en tungstène. Pour obtenir des réponses synaptiques maximales en ACC, enregistrez 10 à 20 réponses et faites-en la moyenne. Ensuite, allumez le DCS et stimulez le thalamus simultanément. Évaluer les changements d’amplitude de la réponse ACC évoquée par stimulation thalamique pendant la DCS.

Maintenant, désactivez le DCS. Ajoutez 250 micromolaires 4-AP et 5 micromolaires biculaires à la solution de perfusion et attendez deux à trois heures. Si les médicaments affectent la tranche de cerveau, la tranche devrait produire des réponses de crise corticale. Par la suite, recueillez 10 à 20 réponses corticales cingulaires antérieures et mesurez l’amplitude et la durée des réponses corticales corticales évoquées électriquement.

Ensuite, allumez le DCS et stimulez le thalamus simultanément. Évaluer les changements dans l’amplitude et la durée des réponses de crise corticale évoquées lors de l’application de la DCS. Après cela, remplacez la solution de perfusion par de l’aCSF frais pour éliminer les médicaments.